產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于血管生成、淋巴管生成、腫瘤轉移及心血管疾病相關研究等領域。
產品名稱:大鼠血管內皮細胞生長因子Delisa試劑盒
英文名稱:VEGF-D ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5359E
檢測原理:

大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠VEGF-D抗體。
結合:加入標準品或樣本,VEGF-D被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗大鼠VEGF-D抗體和HRP標記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
實驗步驟?:

?1. 試劑回溫至 20–25℃,稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min,加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值,擬合曲線算濃度。
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操作步驟?:

?1、試劑與樣本準備?:
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),按說明書稀釋洗滌緩沖液(通常1:19)。
?標準品?:用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?:血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高,可按說明書(如1:10)稀釋。
?2、加樣與孵育?:
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻,避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘(部分試劑盒可能為120分鐘,需以說明書為準)。
?3、洗滌?:
棄去孔內液體,用洗滌緩沖液加滿每孔,靜置30秒后甩干,重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?:
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?:
同步驟3,洗去未結合抗體。
6?、顯色?:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?:
每孔加入50μL終止液,立即混勻(顏色由藍變黃)。
在加終止液后15分鐘內,用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度(OD值)。